高遷移率族蛋白1(HMG-1檢測(cè)試劑盒簡(jiǎn)介

高遷移率族蛋白于1973年在牛胸腺中被提取和鑒定，因其在聚丙烯酰胺凝膠電泳中的高遷移能力而得名。具體可參見Ferrari S, Finelli P, Rocchi M, Bianchi ME (July 1996). "The active gene that encodes human high mobility group 1 protein (HMG1) contains introns and maps to chromosome 13". Genomics 35 (2): 367–71. doi:10.1006/ge996.0369. PMID8661151.。根據(jù)分子質(zhì)量大小、序列相似性和DNA結(jié)構(gòu)特性，HMG可進(jìn)一步分為HMGA、HMGB、HMGN 3個(gè)家族。而HMGB家族又有3個(gè)成員，即HMGB1、HMGB2和HMGB3，三者在氨基酸序列上有80%的一致性。HMGB1是含量zui豐富的HMG蛋白，在典型的哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)約有106個(gè)分子，平均10～15個(gè)核小體即可含有1個(gè)HMGB1分子。HMGB1廣泛分布于淋巴組織、腦、肝、肺、心、脾、腎等組織中，HMGB1除在肝、腦組織中主要存在于胞漿外，在大多數(shù)組織中存在于胞核；而HMGB2/3分布較局限，HMGB2僅分布在睪丸和淋巴組織中，HMGB3僅在胚胎中被發(fā)現(xiàn)，二者可能與胚胎發(fā)育有關(guān)。HMGB1先前也稱HMG1，在進(jìn)化過程中其氨基酸序列高度保守，嚙齒類動(dòng)物與人的氨基酸序列同源性高達(dá)98%以上，小鼠與大鼠氨基酸序列同源性更是高達(dá)100%。

高遷移率族蛋白1(HMG-1檢測(cè)試劑盒操作方法

1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。

4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。

5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽(yáng)性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽(yáng)性。

我司elisa試劑盒的優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、性價(jià)比高、樣品所需量少

1.操作簡(jiǎn)單、快速。所有操作步驟，都有圖譜示意，讓你簡(jiǎn)單明了，不必為研究操作步驟而耽擱時(shí)間。

2.靈敏度高。 酶是一種有機(jī)催化劑，很少量的酶即可誘導(dǎo)大量的催化反應(yīng) ，產(chǎn)生可供觀察的顯色反應(yīng)現(xiàn)象。我們的試劑盒實(shí)現(xiàn)了在ug、ng、pg水平上對(duì)其進(jìn)行定量。

3.特異性強(qiáng)。特異性來自抗體或抗原的選擇性。采用的*抗體抗原，保證的試劑盒品質(zhì)。

4.性價(jià)比高，質(zhì)量穩(wěn)定。

5.樣品所需量少。

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