內(nèi)毒素定量檢測(cè)試劑盒的原理和用途-信帆生物

【用途】顯色基質(zhì)鱟試劑 ( Chromogenic End-point Tachypleus Amebocyte Lysate , CE TAL )用于體外細(xì)菌內(nèi)毒素的定量檢測(cè)，禁止以任何途徑進(jìn)入機(jī)體。

【原理】鱟試劑為鱟科動(dòng)物東方鱟的血液變形細(xì)胞溶解物的冷凍干燥品,鱟試劑中 含有Ｃ因子、Ｂ因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在適宜的條件下（溫 度，pH 值及無(wú)干擾物質(zhì)），細(xì)菌內(nèi)毒素激活 C  因子，引起一系列酶促反應(yīng)， 激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶分解人工合成的顯色基質(zhì)，使其分解為 多肽和黃色的對(duì)硝基苯胺（pNA，λmax = 405nm） 。在一定時(shí)間內(nèi)，pNA 的 生成量與細(xì)菌內(nèi)毒素濃度成正相關(guān)，據(jù)此，可以定量供試品的內(nèi)毒素濃度。 同時(shí)，對(duì)硝基苯胺（pNA）也可用偶氮化試劑染成玫瑰紅色（λmax = 545nm）， 避免了供試品本身的顏色對(duì) 405nm 處吸收峰的干擾。

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【檢測(cè)限】按反應(yīng)時(shí)間不同可檢測(cè) 0.1EU/ml-1 EU/ml 和 0.01EU/ml -0.1EU/ml 兩個(gè)區(qū) 間(  反應(yīng)時(shí)間 T 1  和 T 2  見(jiàn)出廠檢驗(yàn)報(bào)告)  。

【試劑盒組成】

細(xì)菌內(nèi)毒素工作品，5 支  鱟試劑， 1.7ml/支，5 支 顯色基質(zhì)，1.7ml/支，5 支 偶氮化試劑 1，10ml/支，5 支 偶氮化試劑 2，10ml/支，5 支 偶氮化試劑 3，10ml/支，5 支  HCl (反應(yīng)終止劑)， 50ml/瓶，1 瓶

細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水，50ml/瓶，3 瓶

【貯存】陰涼處,  * 2-8℃,避光貯存。

供試品的貯存與預(yù)處理
備注：   若供試品為血液類，請(qǐng)參照我廠配套血液相關(guān)處理試劑使用說(shuō)明書。
1 供試品的 pH 值應(yīng)在 6 - 8 之間，若超出此范圍，需用無(wú)熱原緩沖液、0.1N 氫氧化鈉 或 0.1N 鹽酸調(diào)節(jié)。
2  若供試品中可能存在鱟實(shí)驗(yàn)的干擾物質(zhì)，處理參見(jiàn)【供試品的干擾試驗(yàn)】。
3 若供試品中可能含有β－葡聚糖（β－葡聚糖會(huì)產(chǎn)生 G 因子旁路反應(yīng)，干擾內(nèi)毒素 檢測(cè)），需選用特異性鱟試劑（我公司提供）。
4   若供試品為一些抗菌素如頭孢類抗菌素和磺胺制劑會(huì)對(duì)偶氮染色劑產(chǎn)生偶聯(lián)反應(yīng) 而干擾偶氮化顯色，需要選用不含偶氮化試劑的試劑盒（我公司提供）。
5 若供試品的本底吸光度值大于 0.5,必須對(duì)供試品進(jìn)行稀釋后再檢測(cè)。
6   若供試品顏色較深(例如溶血)，或在酸性條件下顏色加深(例如一些組織培養(yǎng)介質(zhì)), 必須設(shè)置供試品空白管以扣除供試品自身的顏色本底。 供試品空白管不加入鱟試劑，以等體積鱟試劑的溶劑(該處為細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水) 代替。其余操作同供試品管。

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