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秋水仙堿溶液讓我很震撼!
秋水仙堿溶液生物學(xué)作用
用于中期核型分析(濃度較高)
抑制有絲分裂,破壞紡錘體,使染色體停滯在分裂中期。
作用機(jī)理:秋水仙堿可與微管蛋白二聚體結(jié)合,阻止微管蛋白轉(zhuǎn)換,使細(xì)胞停止于有絲分裂中期,從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
時(shí)間:施放于前期,作用于中期。
用于誘變植物多倍體(濃度較低)
作用部位:常用于處理種子、莖生長(zhǎng)點(diǎn)、幼芽、花芽、花粉粒和卵細(xì)胞等。
濃度:0.2%濃度的水溶液
處理時(shí)間:一天
秋水仙堿溶液作用機(jī)理
當(dāng)細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí),一方面能使染色體的著絲點(diǎn)延遲分裂,于是已復(fù)制的染色體兩條單體分離,而著絲點(diǎn)仍連在一起,形成“X”形染色體圖象(稱(chēng)為C-有絲分裂,即秋水仙效應(yīng)有絲分裂);另一方面是引起分裂中期的紡錘絲斷裂,或抑制紡錘體的形成,結(jié)果到分裂后期染色體不能移向兩極,而重組成一個(gè)雙倍性的細(xì)胞核。這時(shí)候,細(xì)胞加大而不分裂,或者分裂成一個(gè)無(wú)細(xì)胞核的子細(xì)胞和一個(gè)有雙倍性細(xì)胞核的子細(xì)胞。經(jīng)過(guò)一個(gè)時(shí)期以后,這種染色體數(shù)目加倍了的細(xì)胞再分裂增長(zhǎng)時(shí),就構(gòu)成了雙倍性的細(xì)胞和組織。
注:1.秋水仙堿是誘變多倍體效果的藥劑之一。
2.著絲點(diǎn)的分離與紡錘體無(wú)關(guān),因?yàn)樵谟们锼蓧A處理,破壞微管的情況下,兩條單體也可以分開(kāi)。這是由于Ca離子的誘導(dǎo),使著絲點(diǎn)分開(kāi)后,再由紡錘體牽引移向兩極,也就是說(shuō)紡錘體只起牽引染色體的作用。此外,秋水仙素還有加快染色體運(yùn)動(dòng),使染色體更快的到達(dá)兩極的作用(濃度很低)。染色體的作用秋水仙堿能抑制有絲分裂,破壞紡錘體,使染色體停滯在分裂中期。這種由秋水仙堿引起的不正常分裂,稱(chēng)為秋水仙堿有絲分裂(C-mitosis)。在這樣的有絲分裂中,染色體雖然縱裂,但細(xì)胞不分裂,不能形成兩個(gè)子細(xì)胞,因而使染色體加倍。自1937年美國(guó)學(xué)者布萊克斯利(A.F.Blakeslee)等,用秋水仙堿加倍曼陀羅等植物的染色體數(shù)獲得成功以后,秋水仙堿就被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)的研究和植物育種的工作中。例如,小麥與黑麥雜交是不育的,用秋水仙堿處理,使染色體加倍,就能變成可育的異源八倍體小黑麥,在云貴高寒地區(qū)種植,產(chǎn)量和品質(zhì)都比小麥和黑麥好。50年代日本用秋水仙堿處理一般甜菜得到了四倍體,后者與二倍體品種相間種植,從四倍體植株上收獲到三倍體種子。推廣種植三倍體甜菜,獲得了很大的經(jīng)濟(jì)效益。
1951年,日本學(xué)者木原均,用同樣方法培育成功三倍體無(wú)籽西瓜,秋水仙堿也起了重要作用。秋水仙堿有jv毒,使用時(shí)要小心。秋水仙堿是誘變多倍體效果的藥劑之一。它的作用機(jī)理是:當(dāng)細(xì)胞進(jìn)行分裂時(shí),一方面能使染色體的著絲點(diǎn)延遲分裂,于是已復(fù)制的染色體兩條單體分離,而著絲點(diǎn)仍連在一起,形成“X”形染色體圖象(稱(chēng)為C-有絲分裂,即秋水仙效應(yīng)有絲分裂);另一方面是引起分裂中期的紡錘絲斷裂,或抑制紡錘體的形成,結(jié)果到分裂后期染色體不能移向兩極,而重組成一個(gè)雙倍性的細(xì)胞核。這時(shí)候,細(xì)胞加大而不分裂,或者分裂成一個(gè)無(wú)細(xì)胞核的子細(xì)胞和一個(gè)有雙倍性細(xì)胞核的子細(xì)胞。經(jīng)過(guò)一個(gè)時(shí)期以后,這種染色體數(shù)目加倍了的細(xì)胞再分裂增長(zhǎng)時(shí),就構(gòu)成了雙倍性的細(xì)胞和組織。
秋水仙堿不論是破壞還是抑制紡錘體的形成,作用都是一時(shí)的。秋水仙堿可以抑制紡錘體的形成,導(dǎo)致細(xì)胞不分裂,——然后過(guò)一段時(shí)間秋水仙堿代謝掉,不再起作用,細(xì)胞繼續(xù)分裂,——然后才是“染色體數(shù)目加倍”(著絲點(diǎn)的分裂)。著絲點(diǎn)的分離與紡錘體無(wú)關(guān),因?yàn)樵谟们锼蓧A處理,破壞微管的情況下,兩條單體也可以分開(kāi)。這是由于Ca離子的誘導(dǎo),使著絲點(diǎn)分開(kāi)后,再由紡錘體牽引移向兩極,也就是說(shuō)紡錘體只起牽引染色體的作用。
秋水仙堿之所以造成兩個(gè)方面的應(yīng)用,是在于他們?cè)诶脮r(shí),秋水仙濃度的不同。用于中期核型分析的濃度較高而用于產(chǎn)生雙倍體或多倍體時(shí)濃度較低,并且當(dāng)秋水仙堿濃度很低時(shí),還能加快染色體運(yùn)動(dòng),使染色體更快的到達(dá)兩極!
那么如何確定作用時(shí)期呢?我們已經(jīng)確定秋水仙堿的作用是抑制或破壞紡錘體微管的形成。在分裂前期,“胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)中的微管去裝配,游離的微管蛋白亞單位組裝為紡錘體。”《細(xì)胞生物學(xué)》(翟中和主編,1995年1月第1版)可見(jiàn),秋水仙堿的作用時(shí)期應(yīng)該為細(xì)胞有絲分裂的前期??捎糜谡T發(fā)基因突變。
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