DEAE-Dextran細胞轉染試劑盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一種適合于把DNA轉染到培養(yǎng)的真核細胞中的轉染試劑盒。
目前基于DEAE-dextran的細胞轉染方法有兩種,一種方法為把DNA和DEAE--dextran混合后加入到細胞中,另一種方法為先用DEAE?-dextran預處理細胞,然后再加入DNA。后一種方法是在前一種方法的基礎上經過改進而產生的,對于一些細胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB細胞等,后一種方法可以增加細胞對DNA的攝入量,顯著改善轉染效果。氯喹的加入可以抑制溶酶體對外源DNA的降解,從而提高轉染效率。但對于具體的細胞、具體的培養(yǎng)條件,如需獲得更加理想的轉染效率,必須自行摸索上述各種轉染方法,找出優(yōu)化的轉染方法。
注意事項:
使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉染效率。
轉染前細胞必須處于良好的生長狀態(tài)。
試劑盒中各試劑均經過無菌處理,可以直接使用。在細胞轉染過程中要嚴格注意無菌操作。
需自備用于洗滌的PBS或HBSS,以及用于稀釋10XPBS的無菌水。
稀釋或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用試劑盒中提供的10XPBS稀釋。
氯喹溶液對人體有害,請注意適當防護。
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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