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抗血清的制備方法
1、動(dòng)物的選擇
羊、馬、雞、猴、豚鼠,都是常用的免疫動(dòng)物,在實(shí)驗(yàn)中,選擇動(dòng)物時(shí)應(yīng)考慮抗原與動(dòng)物的種屬關(guān)系、抗原性質(zhì)與動(dòng)物種類(lèi)、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動(dòng)物個(gè)體等因素。免疫用動(dòng)物應(yīng)選適齡、健壯.為雄性。常用的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是家兔,一般選擇選擇年齡在6個(gè)月以上當(dāng)年繁殖的♂性,體重2 ~3公斤,健康家兔三只,免疫前用金屬編號(hào)牌固定兔耳,或用染料涂沫在動(dòng)物的背部,作出明確的標(biāo)記。
2、抗原制備
1)抗原稀釋:用滅菌生理鹽水將抗原稀釋為2mg/ml,于免疫前一天加入溶液,使每毫升抗原溶液含青霉素1000 UI,鏈霉素1000 UI,放4℃過(guò)夜(一般可不加青、鏈霉素)次日取出,與佐劑混合制成乳劑后用于動(dòng)物免疫。
免疫原的注射劑量應(yīng)考慮其抗原性的強(qiáng)弱、分子量大小、動(dòng)物的個(gè)體狀態(tài)和免疫時(shí)間。對(duì)于純的可溶性抗原的免疫劑量,通常小鼠抗原劑量為50~100μg/次,大鼠為100~200μg/次,兔為100μg ~1 mg/次,合成免疫原為2 mg(半抗原約為20~200μg),一般需要與等量的福氏*佐劑混合。加強(qiáng)免疫的劑量為計(jì)量的1/2,通常用不*福氏佐劑或不用佐劑。如需制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法;反之,欲獲得價(jià)的抗血清,宜采用大劑量抗原長(zhǎng)程免疫法。