植物中脂氧合酶測定原理!
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測定意義:
LOX廣泛存在于植物組織中,催化不飽和脂肪酸氧化反應(yīng),導致膜脂過氧化。在植物的生長發(fā)育、成熟衰老及逆境脅迫過程中具有重要作用。
測定原理:
LOX催化亞油酸氧化,氧化產(chǎn)物在234nm處有特征吸收峰;測定234nm吸光度增加速率,來計算LOX活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2mL試劑二,充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
測定:
1. 分光光度計預(yù)熱30 min以上,調(diào)節(jié)波長到234 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL蒸餾水、160μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于234nm比色,記錄15s和75s的吸光值,分別記為A1和A2。
4. 測定管:依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑三,迅速混勻后于234nm比色,記錄15s和75s的吸光值,分別記為A3和A4。
信帆生物科技有限公司是一家集生物技術(shù)咨詢、實驗室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務(wù)為一體的高科技生物企業(yè),為各大科研機構(gòu)、高校、技術(shù)生物企業(yè)提供相關(guān)產(chǎn)品。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營銷團隊的奮力開拓,市場空間逐步擴大,營銷網(wǎng)絡(luò)覆蓋全國,為客戶供應(yīng)服務(wù),優(yōu)質(zhì)、用心的服務(wù)贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評,在生物設(shè)備領(lǐng)域迅速崛起
植物中脂氧合酶測定原理!