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凍干粉標(biāo)準(zhǔn)菌株正確復(fù)溶方法
【冷凍管開封】 用浸過 75%酒精的脫脂棉嚴(yán)格消毒冷凍管蓋。
【菌株復(fù)溶】無菌環(huán)境中旋開裝有復(fù)溶液的滴瓶蓋,吸取 1ml 左右復(fù)溶液,加入到冷凍管中。輕輕振蕩,使凍干菌 株溶解呈懸浮狀。
【菌株復(fù)壯】用無菌吸管吸取菌懸液,轉(zhuǎn)移到復(fù)溶液滴瓶中。做好標(biāo)識,在適宜溫度下培養(yǎng)。細菌在 30-35℃培養(yǎng) 箱中培養(yǎng) 24-48h,真菌在 20-25℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24-72h(必要時,可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間)。
【菌株傳代】將得到的菌株的新鮮培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接到適宜的固體培養(yǎng)基及液體培養(yǎng)基中(盡量增大接種量:如用無菌吸 管吸取≥50μl 新鮮培養(yǎng)物至固體培養(yǎng)基,邊移動邊緩慢釋放),適宜溫度下培養(yǎng),用以菌株的保藏、傳 代及制備工作菌株。
【注意事項】
1、 菌種活化前,將冷凍管保存在低溫、清潔、干燥的環(huán)境中,長時間室溫下放置會導(dǎo)致菌種衰退;
2、 冷凍管開封、凍干粉復(fù)溶、菌株恢復(fù)培養(yǎng)等操作應(yīng)在無菌條件下進行;
3、 一些菌種經(jīng)過冷凍干燥保存后,延遲期較長,部分需連續(xù)兩次繼代培養(yǎng)才能正常生長;
4、 苛養(yǎng)菌的培養(yǎng)需采用含特定營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,敬請正確選擇,不清楚時來電詢問;
5、 某些厭氧菌的培養(yǎng),自開封到接種完成,均需以無氧氣體充填,以保持厭氧狀態(tài);培養(yǎng)過程中亦要保 持厭氧狀態(tài);
6、 某些菌種,如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、淋病奈瑟菌等需要 5-10%CO2促進生長;
7、 如發(fā)現(xiàn)冷凍管蓋松動、復(fù)溶液渾濁等異常情況,應(yīng)停止使用對應(yīng)產(chǎn)品。
8、 部分菌種有致病性、擴散性,請專業(yè)人員在專業(yè)環(huán)境下有保護性操作。