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小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1檢測(cè)原理!
產(chǎn)品名稱:小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒
規(guī)格:48T/96T
儲(chǔ)存:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個(gè)月
本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用,不做其它用途!
檢測(cè)原理:本試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
實(shí)驗(yàn)步驟(僅供參考):
1. 從室溫平衡60min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3. 待測(cè)樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
4. 隨后標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。