尿素氮檢測(cè)試劑盒測(cè)定原理

尿素氮是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物。氨基酸脫氨基產(chǎn)生NH3和CO2，兩者在肝臟中合成尿素，每克蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生尿素0.3g。尿素中氮含量為28/60，幾乎達(dá)一半。通常腎臟為排泄尿素的主要器官，尿素從腎小球?yàn)V過后在各段小管均可重吸收，但腎小管內(nèi)尿流速越快重吸收越少，也即達(dá)到了最大清除率。和血肌酐一樣，在腎功能損害早期，血尿素氮可在正常范圍。當(dāng)腎小球?yàn)V過率下降到正常的50%以下時(shí)，血尿素氮的濃度才迅速升高。正常情況下，血尿素氮與肌酐之比(BUN/Scr)值約為10.1，高蛋白飲食、高分解代謝狀態(tài)、缺水、腎缺血、血容量不足及某些急性腎小球腎炎，均可使比值增高，甚至可達(dá)20～30；而低蛋白飲食，肝疾病常使比值降低，此時(shí)可稱為低氮質(zhì)血癥。

在加熱和強(qiáng)酸條件下，尿素氮與二乙酰肟縮合成紅色的聯(lián)吖嗪稱之Fearon 反應(yīng)。根據(jù)色澤的深淺可以計(jì)算出尿素氮的含量。 

標(biāo)本：
草酸鹽、肝素或EDTA 抗凝的血漿。血漿中的尿素氮在室溫下可穩(wěn)定24 小時(shí)，而在4～6℃至少穩(wěn)定7 天。尿液用生理鹽水作1:10～1:50 稀釋后與血漿操作相同。若超出線性范圍，須再稀釋。

注意事項(xiàng)：
1、酸溶液與肟溶液可按等量混勻，用量為2mL，但此混合液只能保存7 天左右。
2、比色前若發(fā)現(xiàn)沉淀，則可3500 轉(zhuǎn)/分離心10 分鐘。
3、顏色太深時(shí)，將樣品作適當(dāng)稀釋，結(jié)果再乘以稀釋倍數(shù)。
4、重度脂血標(biāo)本要用除蛋白濾液測(cè)定。
5、試劑4℃保存，有效期一年。
6、本法可以在反應(yīng)完后從反應(yīng)液中吸取適量（200-300μL），加入到96 孔板中（注意不要引入氣泡），酶標(biāo)儀520nm下讀數(shù)，吸光值代入公式計(jì)算。