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人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)

發(fā)布時(shí)間: 2017-03-10  點(diǎn)擊次數(shù): 1198次

人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質(zhì)的激肽基團(tuán)衍生而來(lái)。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強(qiáng)、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動(dòng)的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子,還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴(kuò)張,從而導(dǎo)致血壓降低。

 

緩激肽是一種含有9種氨基酸的生理和藥理活性肽,由蛋白質(zhì)的激肽基團(tuán)衍生而來(lái)。激肽是可以促使血管舒張、血管通透性增強(qiáng)、一氧化氮釋放和花生四烯酸流動(dòng)的效應(yīng)因子。它是血壓、腎功能和心臟功能的重要調(diào)節(jié)因子,還參與炎癥反應(yīng)。緩激肽可引起血管擴(kuò)張,從而導(dǎo)致血壓降低。

人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)

因此,對(duì)這種激素肽的變化進(jìn)行高靈敏度、高選擇性和高準(zhǔn)確度地定量,并將其作為疾病進(jìn)展或藥物治療的評(píng)估指標(biāo),將會(huì)極為有利。盡管以往都是通過(guò)配體結(jié)合試驗(yàn)(LBAs)對(duì)生物制劑進(jìn)行定量分析,但在過(guò)去幾年中利用LC-MS/MS分析大分子已成為一種趨勢(shì)。這在某種程度上是因?yàn)長(zhǎng)BAs產(chǎn)生顯著的交叉反應(yīng)問(wèn)題并且缺乏標(biāo)準(zhǔn)化。

LC-MS/MS具有多種優(yōu)勢(shì),例如開(kāi)發(fā)時(shí)間更短、準(zhǔn)確度和精度更高、可重復(fù)進(jìn)樣,并且容易區(qū)分相似度很高的類似物、代謝物或內(nèi)源性干擾物。常見(jiàn)的肽通常難以通過(guò)LC-MS/MS進(jìn)行分析,這是因?yàn)槠洳灰纂x子化以及不易產(chǎn)生理想的碎片離子而導(dǎo)致MS靈敏度較低,從而使得LC和樣品制備方法開(kāi)發(fā)非常困難。由于緩激肽在血漿中的濃度低至pg/mL水平且代謝速度快,在采血和樣品制備過(guò)程中還可通過(guò)蛋白水解人為生成,因此對(duì)其進(jìn)行準(zhǔn)確定量相當(dāng)困難。

本研究采用了專門設(shè)計(jì)的血液收集技術(shù)以防止體外緩激肽的形成,并且利用混合型固相萃取(SPE)和實(shí)心核顆粒色譜柱,zui大限度降低并消除基質(zhì)干擾的同時(shí)提高定量分析的靈敏度。

人血漿中緩激肽的SPE LC-MS/MS定量檢測(cè)方法開(kāi)發(fā)

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ELISA試劑盒:進(jìn)口ELISA試劑盒,國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒,人elisa試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒等。

培養(yǎng)基:微生物培養(yǎng)基,顯色培養(yǎng)基,BD培養(yǎng)基,gibco培養(yǎng)基等。

血清:胎牛血清,人血清,動(dòng)物血清,NQBB,Hyclone,Gbico原裝血清 。

生物試劑:Amresco,Sigma,ABM,BIO-RAD,BD,ABCAM等進(jìn)口試劑。

標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品:進(jìn)口對(duì)照品,進(jìn)口對(duì)照藥材,進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品.

抗體:一抗,二抗,流式抗體等。

放免試劑盒:進(jìn)口放免試劑盒,國(guó)產(chǎn)放免試劑盒,進(jìn)口美國(guó)鳳凰等放免試劑盒。

實(shí)驗(yàn)室代測(cè)服務(wù):放免代測(cè),WB實(shí)驗(yàn),免疫組化代測(cè),熒光定量PCR代測(cè),病理細(xì)胞染色代測(cè),生化實(shí)驗(yàn)代測(cè)等。

 

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