溶菌酶簡介

中文名稱：溶菌酶

中文同義詞：脆壁質(zhì)酶；雞蛋白；胞壁質(zhì)酶(N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶);溶菌酶(雞蛋清)

英文名稱：Lysozyme,簡稱LZM

英文同義詞：REDUCED LYSOZYME,WATER SOLUBLE;MUCOPEPTIDE-GLYCOHYDROLASE;MUCOPEPTIDE GLYCOLHYDROLASE;MUCOPEPTIDE N-ACETYLMURAMOYLHYDROLASE;VI: CHLORIDE;MURAMIDASE;MURAMIDASE GRADE III

CAS號：12650-88-3

EINECS號： 235-747-3[1]

分子式：無

分子量：14000左右

EINECS號：235-747-3

相關類別：發(fā)酵劑；Enzymes;酶；生化試劑；生物化學品。

溶菌酶性質(zhì)

儲存條件：2-8°C

form：powder

color：white

危險品標志B

安全說明23-24/25-22

WGK Germany3

RTECS號 OL5989850

F3-10

白色或微白色凍干粉，溶于水，不溶于丙酮，pI為11.0-11.35，zui適pH值6.5。

穩(wěn)定性：酸性介質(zhì)中可穩(wěn)定存在，堿性介質(zhì)中易失活；96℃， pH值為3條件下，15min后活力保持87%。

抑制劑：有碘、咪唑和吲哚衍生物、表面活性劑(十二烷基硫酸鈉、醇類和碳鏈不少于12的脂肪酸)。1%水溶液在281.5nm處的吸光系數(shù)為26.4。通過水解細菌細胞壁的肽聚糖來溶菌。

酶反應：Micrococcus luteus或Micrococcus lysodeikticus菌懸浮液═溶菌并澄清。

溶菌酶用途

用于生化研究，上用于急慢性咽喉炎、扁平苔癬、扁平疣等疾病的治療。

生物試劑

以蛋清為原料，在pH6.5條件下用弱酸性陽離子交換樹脂732吸附后，再用硫酸銨洗脫，經(jīng)透析后冷凍干燥得產(chǎn)品。

溶菌酶制備

溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,它是一種天然酶，安全綠色的添加劑，無抗藥性。

該酶廣泛存在于人體多種組織中，鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量zui為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。它富含堿性氨基酸，有4對二硫鍵維持酶構型，是一種堿性蛋白質(zhì)，其N端為賴氨酸，C端為亮氨酸?？煞纸馊鼙谖⑶蚓⒕薮笱挎邨U菌、黃色八疊球菌等革蘭陽性菌。

溶菌酶在等電點以下較廣泛的pH值范圍內(nèi)，分子帶正電荷，可吸附于弱酸性陽離子交換樹脂上，洗脫后鹽析，可得溶菌酶沉淀，再進行精制可得成品。蛋清吸附↓724樹脂洗滌↓緩沖液洗脫↓硫酸銨溶液鹽析透析去堿性蛋白↓NaOH凍干溶菌酶凍干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，將新鮮蛋清540kg加入到已處理好的80kg 724樹脂中，攪拌吸附6h，在0～5℃靜置。傾出上層蛋清，樹脂離心甩干，用蒸餾水反復洗去黏附的卵蛋白，然后將樹脂裝入柱內(nèi)，用0?15mol/L、pH=6?5磷酸緩沖溶液約150L洗滌樹脂，再用約600L的10%硫酸銨溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液中加硫酸銨，使zui終含硫酸銨量為40%，有白色沉淀生成，冷處放置。虹吸上層清液，沉淀吸濾抽干，再用1倍蒸餾水溶解沉淀呈稀糊狀，然后裝入透析袋，在約5℃的條件下，對蒸餾水透析24h左右，中間換水2～3次。離心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液與離心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L溶液，同時不斷攪拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即離心除去。然后用3mol/L鹽酸調(diào)pH=5?0，冷凍干燥，即得白色片狀溶菌酶。也可將離心液用3mol/L鹽酸調(diào)pH=3?5，在攪拌下緩慢加入5%的固體氯化鈉，在約5℃的溫度下靜置48h，離心，沉淀用0℃丙酮洗滌，干燥，即得溶菌酶。

溶菌酶優(yōu)點

1．溶菌酶是很穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，有較強的抗熱性。蛋清溶菌酶是C型，是已知的zui耐熱的酶；

2．溶菌酶不會因為有機溶劑的處理而失活，當轉(zhuǎn)移到水溶液中時，溶菌酶的活力可全部恢復；

3．溶菌酶可被冷凍或干燥處理，且活力穩(wěn)定；

4．溶菌酶適宜pH5.3~6.4，可用于低酸性食品防腐；

5．溶菌酶生物試劑成本較低；

6．溶菌酶的抗菌譜較廣，不僅局限于G- 菌，對部分G+菌也有抑制效果；

7．溶菌酶作為防腐劑安全性高。溶菌酶是一種天然蛋白質(zhì)，1992年FAO/WTO 的食品添加劑協(xié)會已經(jīng)認定溶菌酶在食品中應用是安全的。

溶菌酶應用

它對革蘭陽性菌、好氧性孢子形成菌、枯草桿菌、地衣型芽孢桿菌等都有抗菌作用，而對沒有細胞壁的人體細胞不會產(chǎn)生不利影響。因此，適合于各種食品的防腐。另外，該酶還能殺死腸道球菌，增加腸道抗感染力，同時還能促進嬰兒腸道雙歧乳酸桿菌增殖，促進乳酪蛋白凝乳利于消化，所以又是嬰兒食品、飲料的良好添加劑。溶菌酶對人體*無毒、*，具有抗菌、抗病毒、抗腫瘤的功效，是一種安全的天然防腐劑。在干酪的生物試劑中，添加一定量的溶菌酶，可防止微生物污染而引起的酪酸發(fā)酵，以保證干酪的質(zhì)量。新鮮的牛乳中含有少量的溶菌酶，每100mL約含13mg，而人乳中含有40mg/mL溶菌酶。若在鮮乳或奶粉中加入一定量的溶菌酶，不但有防腐保鮮劑的作用，而且可達到強化嬰兒乳品的目的，有利于嬰兒的健康。

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