發(fā)布時(shí)間: 2017-04-07 點(diǎn)擊次數(shù): 909次
ELISA試劑盒對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義
Elisa試劑盒用于診斷檢測(cè),每次檢測(cè)能夠快速、準(zhǔn)確地處理2個(gè)微孔板,不僅大大降低了所需技術(shù)人員的操作時(shí)間,而且同時(shí)還提高了檢測(cè)速度和檢測(cè)結(jié)果的可靠性。ELISA試劑盒的特點(diǎn)是可以同時(shí)進(jìn)行大量標(biāo)本的檢測(cè),并可在特定的比色計(jì)上迅速讀出結(jié)果。現(xiàn)在已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反應(yīng)板型的Elisa試劑盒檢測(cè),包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,Elisa試劑盒對(duì)操作的標(biāo)準(zhǔn)化有重要意義。
1.ELISA試劑盒將抗原抗體反響固相化:即實(shí)驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體外表。其機(jī)制可能是聚苯乙烯外表間的疏水基團(tuán)能夠無(wú)挑選性地吸附蛋白分子。Elisa試劑盒此物理性吸附不損壞蛋白分子結(jié)構(gòu),Elisa試劑盒堅(jiān)持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
2.關(guān)閉:固相吸附蛋白對(duì)錯(cuò)特異性的,在包被意圖免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相外表依然有吸附其它蛋白的才能,為了保證抗原抗體反響的特異性,因而,包被剩下的固相外表應(yīng)該用抗原抗體反響無(wú)關(guān)蛋白關(guān)閉。一般以為牛血清白蛋白是zui為抱負(fù)的關(guān)閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
3.抗原抗體反響:抗原或抗體在恰當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反響。
4.酶反響:酶能夠經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵與抗原或抗體連接構(gòu)成物,當(dāng)抗原抗體反響的時(shí)分,被檢查靶方針中也了酶分子。
5.底物反響:在抗原抗體中的酶分子,Elisa試劑盒能夠促使底物發(fā)作色彩反響,檢查人員能夠裸眼調(diào)查,能夠經(jīng)過(guò)色彩來(lái)斷定是不是有免疫反響的存在,經(jīng)過(guò)色彩的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在恰當(dāng)?shù)牟ㄩL(zhǎng)讀取吸光度值。
ELISA試劑盒的基本原理即是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反響,并經(jīng)過(guò)酶催化底物發(fā)作化學(xué)變化將抗原抗體反響經(jīng)過(guò)色彩的方式顯現(xiàn)出來(lái)。
Elisa試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,Elisa試劑盒已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。Elisa試劑盒依據(jù)酶與有關(guān)底物顯色反應(yīng)形成光密度變化,利用光電比色的原理而設(shè)計(jì)制造的。