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人a干擾素(IFN-a)elisa試劑盒基本信息
α-干擾素是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,是機(jī)體受到病毒感染時(shí),免疫細(xì)胞通過(guò)抗病毒應(yīng)答反應(yīng)而產(chǎn)生的一組結(jié)構(gòu)類(lèi)似、功能接近的低分子糖蛋白。干擾素在機(jī)體的免疫系統(tǒng)中起著非常重要的作用。干擾素與很多亞型,其中zui大的一類(lèi)亞型是α-干擾素。人α-干擾素,是從人白細(xì)胞中克隆出α-干擾素基因,通過(guò)的基因工程技術(shù),在體外大規(guī)模生物試劑出的人α-干擾素。與天然α-干擾素相比,它純度高、副作用低、療效更確切。目前重組人α-干擾素亞型較多,其中α-1b是正常中國(guó)人體內(nèi)產(chǎn)生zui多的一種亞型,經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明重組α-1b干擾素具有療效顯著,而副作用顯著低于α-2a和α-2b的特點(diǎn),因而更適合黃種人使用。
人a干擾素(IFN-a)elisa試劑盒
雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱(chēng)洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
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